今天聊聊怎么把光谱分析做得更准,咱们从头说起。比色皿这玩意儿,看着不起眼,选错了数据能给你偏出去5%,甚至本来阴性的结果都变成阳性了。真正决定数据好坏的,不光是要把它擦得锃亮,关键还得看它和测试的波长、样品吸光度能不能对上号。 先给大家提个醒,选对材质这事儿不能含糊。紫外区的活儿必须交给石英比色皿去干,毕竟玻璃一旦过了360纳米,吸光度就会直接爆表,读数全乱套。要是在可见区用石英,那就是多花钱找罪受。区分这两样最简单的办法是看标签上的字母:标Q的是石英,标G的是玻璃;要是不放心还可以拿钥匙刮一刮,留下划痕的那就是玻璃;最保险的还是把空皿上机测一下190纳米处的吸光度,数值爆高的肯定是玻璃。 光程长度怎么挑也有讲究。颜色淡的样品得配长光程的比色皿来“撑场面”,让信号能爬得更高;颜色深的就得用短光程的,不然信号太满了会导致读数飘移。记住这个公式:吸光度等于摩尔吸光系数乘以浓度再乘以光程。要是浓度太高或者颜色太深,就先把光程缩一缩、把浓度降一降,别硬往里面塞东西。 操作的时候也得有讲究。手里捏的时候只能摸侧面的毛面,千万别去碰光学面,一旦沾了指纹吸光度能多测出来0.1个单位;别让腐蚀性的酸碱液体在里面泡太久,用完马上拿清水冲干净;千万别用火烧或者用热风吹干;透光面不能沾上硬物和脏东西;装液体的时候也别倒得太满,留个1/3的空气层防止液体晃出来洒了。 洗比色皿也是门技术活。先用水冲一遍再泡点稀氨水或者稀盐酸去去无机盐的垢渍;有机物残留可以用酒精来对付;用棉签蘸着洗液打圈刷洗的时候记得别让底部积水珠;最后一定要用95%的无水乙醇淋洗两遍去去油又能快干。 最后两步校正是关键。第一步是空白校正:往几个比色皿里都倒点蒸馏水,把吸收最小的那个调成0吸收值,别的皿直接读数就行;如果这组皿之间的差值超过了0.5%,那说明这组皿都废了得重新买。第二步是光程校正:配一支480纳米、吸光度是0.4的标准液注入标准皿和待测皿里;以标准皿的吸光度为1.00算出待测皿的校正系数;以后测样品的时候把实测值乘以这个系数就能得到真实数据了。这一步做下来能把系统误差压到ppm级别的小不点上。